Qualificação de Doutorado: 18/01/2019
Local: Sala SAT-02 ICB-UFPA.
Horário: 14h
Título: CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE TUMORES MAMÁRIOS CANINOS: IDENTIFICAÇÃO DE MARCADORES DIAGNÓSTICOS, PROGNÓSTICOS E DE SUSCETIBILIDADE
Discente: DANILO DO ROSÁRIO PINHEIRO
Docente: BARBARA DO NASCIMENTO BORGES
Resumo: O câncer de mama é o tumor maligno mais frequente e a segunda causa de morte entre mulheres no mundo. Em fêmeas caninas, os tumores de mama também são os mais frequentes, especialmente em animais não castrados. É um tumor que possui uma etiologia multifatorial, incluindo fatores intrínsecos, como os genéticos, e extrínsecos, como uso de terapia hormonal contraceptiva. É um tipo de câncer altamente agressivo, considerando uma doença heterogênea, com diferentes características histopatológicas, moleculares e clínicas, resultando em diferentes prognósticos e resposta ao tratamento. Em termos moleculares, estes tumores podem ser divididos em subtipos de acordo com a presença/ausência de alguns marcadores, sendo que cada um apresenta um conjunto diferencialmente expresso de genes. Apesar de ser considerado um modelo para a carcinogênese mamária humana, pouco ainda se sabe sobre este processo em caninos, principalmente no que concerne às vias dos diferentes subtipos moleculares. Dessa forma, o presente trabalho visa caracterizar, em nível molecular, os diferentes subtipos de tumores mamários de cadelas, bem como identificar potenciais marcadores de diagnóstico, prognóstico e de suscetibilidade. Para tanto, amostras caninas de tecido neoplásico e não-neoplásico de mama serão coletadas no Hospital Veterinário da UFRA (HOVET). A identificação dos subtipos moleculares será realizada pela técnica de Western Blot utilizando os anticorpos anti-ER, -PR, -HER2, -CK14, -CK5/6. Para a identificação de marcadores diagnósticos e prognósticos, será realizada a quantificação da expressão gênica, onde alvos previamente descritos como marcadores diferencialmente expressos em humanos, serão avaliados por PCR em tempo real utilizando o sistema TaqMan. A identificação de marcadores de suscetibilidade será realizada utilizando a plataforma de array SNP Affymetrix 700k (Affymetrix Inc.) seguindo os protocolos do fabricante. Já a quantificação global do padrão de hidroximetilação será realizada utilizando o kit Quest 5-hmC DNA (Zymo), seguindo as instruções do fabricante. A correlação entre os resultados obtidos será realizada por meio de análise estatística utilizando os programas BioEstat e GraphPad Prism, sendo que resultados com p<0,05 serão considerados estatisticamente significativos.